人信号传导及转录激活因子shRNA载体的构建与鉴定

作者：徐伶; 杨宗兴; 陈峰; 虞容; 杨劲; 孟忠华

来源：浙江医学, 2013, 35(22): 1992-1994+2042.

• RNA干扰
• 人信号传导及转录激活因子1
• 小发夹状RNA

目的构建针对人信号传导及转录激活因子1(STAT1)基因的shRNA表达载体,检测其对STAT1基因的沉默效果。方法设计针对STAT1的shRNA序列,克隆到pGPU6质粒载体,并进行测序、转染和鉴定。结果 DNA测序显示成功构建了4个shRNA表达载体。shRNA能有效抑制STAT1基因在人宫颈癌细胞株TZM-bI细胞中的表达,抑制率为63%。结论成功构建了针对人STAT1基因的shRNA表达载体pGPU6/GFP/Neo-shRNA STAT1。

• 单位
  传染病诊治国家重点实验室; 浙江大学医学院附属第一医院; 浙江省血液中心