饥饿诱导三阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-231的自噬应答观察

作者：刘宇坤; 胡杨; 卯升义; 许安永; 邹迪; 熊喆; 成文敏^*; 赵红业^*

来源：山东医药, 2020, 60(18): 21-24.

• 细胞自噬
• 饥饿
• 微管相关蛋白轻链3
• 自噬相关基因ATG7
• 自噬相关蛋白4A
• 三阴性乳腺癌

目的观察饥饿诱导三阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-231的自噬应答情况,并探讨其相关分子机制。方法将MDA-MB-231细胞分为四组,对照组加入DMEM培养液正常培养; Baf-A1组在DMEM培养液中加入100 n M的Baf-A1; EBSS(饥饿)组加入EBSS培养液; EBSS+Baf-A1(自噬阻断)组在EBSS培养液中加入100 n M的Baf-A1,四组均处理8 h后,分别采用实时荧光定量法和Western blotting法检测各组微管相关蛋白轻链3(LC3B)、自噬相关蛋白7(ATG7)和自噬相关蛋白4A(ATG4A)的mRNA及蛋白。结果与对照组比较,EBSS组LC3B、ATG7 mRNA相对表达量升高,ATG4A mRNA相对表达量降低;与EBSS组比较,EBSS+Baf-A1组LC3B mRNA相对表达量升高、ATG7 mRNA相对表达量降低,与Baf-A1组对比,EBSS+Baf-A1组中LC3B mRNA相对表达量增加,ATG7和ATG4A mRNA相对表达量降低。与对照组比较,EBSS组LC3BⅡ/LC3BⅠ升高,ATG4A蛋白表达降低;与EBSS组比较,EBSS+Baf-A1组LC3BⅡ/LC3BⅠ增加,ATG7蛋白表达降低;与Baf-A1组相比,EBSS+Baf-A1组LC3BⅡ/LC3BⅠ增加,ATG7蛋白表达降低。结论 EBSS处理的MDA-MB-231细胞自噬水平升高,细胞自噬体形成增多,在此过程中EBSS可能通过增加ATG7 mRNA的表达量增加细胞自噬水平。

• 单位
  大理大学; 云南农业大学