基于CRISPR/Cas9的月季TCP9基因融合表达载体构建

作者：李聪; 杨莹莹; 王美军; 陈己任^*

来源：分子植物育种, 2019, 17(24): 8120-8124.

DOI：10.13271/j.mpb.017.008120

• eGFP
• 农杆菌
• 表达载体
• 月季
• 拟南芥

CRISPR/Cas9基因编辑系统是植物基因功能研究的重要工具,月季TCP9基因可以调控花器官的发育,应用CRISPR/Cas9技术构建敲除月季TCP9基因的表达载体,可以为月季TCP9基因的调控机制提供更多信息。根据TCP9基因的保守序列,设计了一对互补引物,用T4连接酶连接到质粒载体pKSE402 (该载体含有eGFP)中;通过测序确定所构建载体的正确性,通过冻融法将含有TCP9基因的重组质粒转入农杆菌(EHA105)中。以农杆菌为模板PCR扩增以及eGFP瞬时表达证明月季TCP9基因敲除表达载体已构建成功。本研究表明了含有TCP9基因的表达载体能在植物中高效表达,为进一步研究提供了一定的科学依据。

• 单位
  湖南农业大学