烟草根系蛋白质双向电泳样品制备方法的比较

作者：林世锋; 张拓; 史跃伟; 王东茂; 王志红; 杨志晓; 谢升东; 魏开华; 任学良

来源：贵州农业科学, 2012, (08): 71-74.

• 烟草
• 根系
• 蛋白质
• 蛋白质组
• 蛋白提取
• 双向电泳
• 制备方法 tobacco
• root
• proteome
• protein extraction
• two-dimensional electrophoresis

为探索适于烟草根系蛋白质组学研究的样品制备方法,以栽培品种K326生长期根系为材料,比较了常规裂解液法、TCA/丙酮沉淀法、Trizol抽提法和酚法等4种总蛋白质的提取方法。对制备的样品进行聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及双向电泳(2-DE)检测。结果表明:酚法最佳,所获蛋白在单向SDS-PAGE中形成条带数目多而清晰;经双向电泳分离用银染显色,可检测约548个蛋白点,图谱分辨率较好,蛋白点清晰,主要集中在等电点pH5～8、相对分子量25.0～70.0kD,可有效解析烟草根系的蛋白质组。

• 单位
  北京蛋白质组研究中心; 贵州省烟草科学研究所; 蛋白质组学国家重点实验室