沉默XIAP基因对人乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响

作者：张颖超; 王禹; 房学东

来源：中华普通外科杂志, 2007, 22(9): 676-679.

DOI：10.3760/j.issn:1007-631X.2007.09.012

• 乳腺肿瘤
• 基因疗法
• RNA
• 转染

目的 研究siRNA(small interfering RNA)对MCF-7细胞株XIAP(X-chromosome-linked inhibitor of apoptosis protein,XIAP)基因表达的抑制作用及对癌细胞增殖抑制和凋亡诱导作用.方法 体外转录法合成特异性针对人XIAP基因的siRNA;荧光标记法标记XIAP siRNA;脂质体法将siRNA转入MCF-7细胞;流式细胞仪检测siRNA的转染效率;半定量RT-PCR及Western blot法检测siRNA对XIAP基因表达的抑制作用;MTT法检测siRNA对细胞生长增殖抑制作用;TUNEL法观察siRNA诱导细胞凋亡的作用.结果 siRNA的转染效率在一定剂量范围内随浓度的增加而增加,siRNA转染组XIAP mRNA表达水平可下调约77%,对照组mRNA表达水平无明显改变.细胞生长增殖抑制率在一定范围内具有剂量依赖性和时间依赖性.荧光显微镜下观察肿瘤细胞发现,siRNA50、100、200 nmol/L转染组出现典型的凋亡形态学变化.结论 体外转录合成的siRNA能特异有效下调XIAP基因的表达,瞬时转染XIAP siRNA能有效抑制乳腺癌细胞增殖并诱导其凋亡,低剂量XIAPsiRNA对瘤细胞显示了显著的抗增殖作用.

• 单位
  吉林大学第二医院