米诺环素对OGD/R诱导的H9c2细胞损伤的作用研究

作者：宜全; 陈秀会; 谭芳慧; 刘英华^*

来源：中国临床药理学杂志, 2019, 35(22): 2848-2851.

DOI：10.13699/j.cnki.1001-6821.2019.22.020

• 米诺环素
• 氧糖剥夺
• 复氧
• H9c2细胞
• 细胞凋亡

目的观察米诺环素对H9c2心肌细胞氧糖剥夺(OGD)/复氧复糖(R)损伤的保护作用,并研究其作用机制是否与抗凋亡有关。方法用减少氧气和糖的供给造成急性心肌细胞缺氧缺糖,然后在预定时间内恢复氧及正常含糖培养基供应的方法建立OGD/R模型。将心肌H9c2细胞分为正常组(常规培养不加干预)、模型组(OGD 6 h/1 h,OGD 6 h/6 h,OGD 6 h/12 h)和低、中、高浓度实验组(OGD/R+1,10和50μmol·L-1米诺环素)。用台盼蓝和噻唑蓝法检测不同浓度米诺环素和不同时间点复氧对H9c2细胞OGD/R损伤诱导的细胞死亡率或存活率的影响。用Western blotting法检测米诺环素对凋亡相关蛋白Cleaved-Caspase 3、Bax、Bcl-2、JNK及p-JNK的影响。结果在OGD 6 h/R 6 h条件下,模型组细胞死亡率为(30. 11±6. 16)%,与正常组(1. 23%)和中浓度实验组(9. 33±2. 01)%比较,差异均有统计学意义(均P <0. 01)。在OGD 6 h/R 6 h条件下,正常组、模型组和中、高浓度实验组细胞OD值分别为0. 35±0. 01,0. 23±0. 02,0. 27±0. 02和0. 28±0. 03;在OGD 6 h/R 12 h条件下,正常组、模型组和高浓度实验组细胞OD值分别为0. 37±0. 01,0. 27±0. 02和0. 32±0. 02,2个模型组分别与相应的正常组和中或高浓度实验组比较,差异均有统计学意义(均P <0. 05)。在OGD 6 h/R 6 h条件下,正常组、模型组和低、中、高浓度实验组的Cleaved Caspase-3蛋白相对表达量分别为0. 83±0. 03,1. 65±0. 24,1. 47±0. 09,1. 29±0. 17和0. 88±0. 16,p-JNK和JNK蛋白相对表达量的比值分别为0. 45±0. 06,0. 84±0. 06,0. 75±0. 05,0. 58±0. 07和0. 37±0. 05,模型组的上述指标与正常组和低、中、高浓度实验组比较,差异均有统计学意义(均P <0. 05,P <0. 01)。在OGD 6 h/R 6 h条件下,正常组、模型组和高浓度实验组的Bax和Bcl-2蛋白相对表达量的比值分别为0. 52±0. 10,1. 00±0. 13和0. 72±0. 18,模型组的上述指标与正常组和高浓度实验组比较,差异均有统计学意义(均P <0. 05)。结论米诺环素对H9c2细胞OGD/R损伤有保护作用,其保护机制与调节凋亡相关蛋白的表达从而抑制凋亡有关。

• 单位
  广州医科大学