酵母双杂交筛选人乳腺cDNA文库中与Gankyrin相互作用的蛋白

作者：顾跃西; 梁冰; 满江红; 李慧艳; 李爱玲; 张学敏; 周涛

来源：生物技术通讯, 2009, (02): 177-179+186.

• Gankyrin
• 酵母双杂交
• RhoGDI2
• 免疫共沉淀
• GSTpull-down

目的:应用酵母双杂交技术,筛选与Gankyrin有相互作用的蛋白质。方法:应用酵母双杂交系统,以Gankyrin基因全长为诱饵,在人乳腺cDNA文库中筛选能与Gankyrin相互作用的蛋白质,并运用营养缺陷型培养基和X-α-Gal等实验提供的信息,筛除假阳性克隆。结果:以Gankyrin为诱饵筛选出了5个阳性克隆,对其中一个蛋白质RhoGDI2与Gankyrin进行了免疫共沉淀与GSTpull-down实验验证,证实了它们的相互作用。结论:Gankyrin能与RhoGDI2发生相互作用,在此基础上,可以开展Gankyrin调控肿瘤发生机制的研究。