鸡白细胞介素-2原核表达及其活性鉴定

作者：韩顺子; 黄霞; 孟闯; 耿士忠; 康喜龙^*; 潘志明; 焦新安

来源：中国家禽, 2023, 1-6.

• ChIL-2
• 原核表达
• 生物活性
• 多克隆抗体

试验旨在获得具有生物活性的鸡白细胞介素-2(ChIL-2)重组蛋白。试验以克隆获得的ChIL-2基因为模板，分别构建原核重组表达菌BL21(p Cold-ChIL-2)和BL21(pGEX-6P-1-ChIL-2)，进行诱导表达和纯化；通过BrdU ELISA法检测重组蛋白诱导鸡脾脏淋巴细胞的增殖情况，评估其生物活性；以rHis-ChIL-2免疫小鼠制备多克隆抗体。结果显示：成功构建了原核重组表达菌BL21(pCold-ChIL-2)、BL21(pGEX-6P-1-ChIL-2)；经表达纯化后分别获得纯度较高的rHis-ChIL-2和rGST-ChIL-2蛋白，大小分别为14 ku和39.4 ku;rHis-ChIL-2和rGST-ChIL-2蛋白分别能够促进脾脏淋巴细胞显著或极显著增殖（P<0.01或P<0.001），均具有良好的生物活性；以纯化的rHis-ChIL-2免疫小鼠制备的多克隆抗体效价为5.12×105，可识别r His-ChIL-2和rGST-ChIL-2，与真核表达的ChIL-2蛋白反应。结果表明，原核表达的重组蛋白ChIL-2具有良好的生物活性，采用其制备的多克隆抗体可识别真核表达的ChIL-2蛋白，为后期ChIL-2的检测奠定基础。

• 单位
  扬州大学