固醇调节元件结合蛋白1c对骨骼肌细胞胰岛素受体底物1表达调控的影响

作者：尹雯雯; 毕艳; 陈莹莹; 汤孙寅焱; 孙婧; 吴文君; 曹姝; 朱大龙

来源：中华糖尿病杂志, 2014, 6(02): 106-111.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1674-5809.2014.02.010

• 固醇调节元件结合蛋白1c
• 胰岛素受体底物1
• 胰岛素抵抗
• 骨骼肌细胞

目的探讨固醇调节元件结合蛋白1c(SREBP-1c)对大鼠骨骼肌细胞胰岛素受体底物1(IRS-1)表达调控的影响。方法采用酶联合消化法取23 d SPF级雄性SD大鼠原代骨骼肌细胞,将原代细胞分为对照组(C)、对照+胰岛素组(C+I)、高脂组(PA)及高脂+胰岛素组(PA+I)。将表达SREBP-1c腺病毒转染L6细胞,根据感染复数(MOI)分为含绿色荧光蛋白阴性载体(GFP)组、MOI值为5、50、100、200组。将靶基因为SREBP1c的干扰RNA(siRNA)转染L6细胞,并分为空白对照组、阴性siRNA组及SREBP-1c siRNA组。Western blotting和实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测SREBP-1c、IRS-1、蛋白激酶B(Akt)基因及蛋白表达,油红O染色法检测细胞内脂质沉积情况。多组资料比较采用方差分析,两两比较采用最小显著差异法。结果与C组相比,PA组SREBP-1 c基因和蛋白水平升高(分别为2.72±0.08比1.00±0.18,3.02±0.19比1.00±0.05,t=15.240、18.289,均P<0.05),IRS-1基因和蛋白水平降低(分别为0.71±0.04比1.00±0.05,0.82±0.04比1.00±0.04,t=-7.960、-6.052,均P<0.05),丝氨酸磷酸化IRS-1蛋白表达升高,丝氨酸磷酸化Akt(p-Akt)蛋白表达下降(t=20.987、-5.869,均P<0.05)。与GFP组相比,MOI值为50、100和200组的SREBP-1c基因和蛋白表达呈剂量依赖性上升(均P<0.05),IRS-1基因和蛋白表达水平呈剂量依赖性下降(均P<0.05)。与空白对照组和阴性siRNA组相比,SREBP-1c siRNA组SREBP-1c基因和蛋白水平降低,IRS-1蛋白表达升高(均P<0.05)。结论SREBP-1c可抑制骨骼肌IRS-1胰岛素信号通路,参与肌细胞胰岛素抵抗的发生。

• 单位
  南京医科大学; 南京大学医学院附属鼓楼医院