腺苷A3受体激活对肠上皮细胞屏障的调节作用及其机制

作者：肖鹏; 吕敏敏; 安晓萌; 张霁; 司徒伟基; 任天华^*

来源：国际消化病杂志, 2021, 41(06): 445-450.

DOI：10.3969/j.issn.1673-534X.2021.06.011

• 腺苷A3受体
• 肠上皮细胞屏障
• 紧密连接
• 核因子-κB

目的探讨腺苷A3受体(A3AR)激活对体外肠上皮细胞屏障的作用及其潜在机制。方法使用A3AR激动剂2-Cl-IB-MECA处理TNF-α诱导的Caco-2细胞损伤模型。采用跨上皮细胞电阻值(TEER)法和细胞旁通透性测定法评估体外培养的上皮细胞屏障功能。采用免疫荧光法和蛋白质印迹法评估紧密连接蛋白ZO-1的分布和表达。采用蛋白质印迹法检测NF-κB p65、肌球蛋白轻链激酶(MLCK)和磷酸化肌球蛋白轻链(p-MLC)的表达水平。采用ELISA法检测细胞培养上清液中促炎细胞因子IL-1β、IL-8的表达水平。结果与对照组相比,TNF-α组TEER降低,细胞旁通透性增高,ZO-1表达水平降低,NF-κB p65、MLCK、p-MLC、IL-1β和IL-8的表达水平均升高,两组的差异均有统计学意义(P均<0.05)。与TNF-α组相比,2-Cl-IB-MECA组TEER升高,细胞旁通透性降低,ZO-1表达水平升高,NF-κB p65、MLCK、p-MLC、IL-1β和IL-8的表达水平均降低,两组的差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论 A3AR激活可减轻肠上皮细胞屏障损伤,该作用可能通过抑制NF-κB/MLCK/p-MLC信号通路实现。

• 单位
  中心实验室; 香港大学深圳医院