小麦淀粉分支酶基因SBE-Ⅱb植物表达载体的构建及表达鉴定

作者：王自布; 齐军仓; 李卫华; 曹连莆; 石培春

来源：江西农业大学学报, 2013, (03): 620-625.

DOI：10.13836/j.jjau.2013110

• 小麦
• 转基因
• 实时荧光定量(qRT-PCR)
• 淀粉分支酶基因(SBE-Ⅱb) wheat(Triticun aestivum L.)
• transgene
• quantitative real-time PCR(qRT-PCR)
• starch branching enzyme gene(SBEⅡb)

从花后15 d的小麦(Triticum aestivum L.)胚乳中提取RNA,根据GeneBank上已经公布的小麦淀粉分支酶基因(SBE-Ⅱb)序列(AY740401.1)设计引物,经RT-PCR扩增得到一条2 511 bp的条带,测序结果与公布的序列一致。将克隆得到的基因构建到了植物表达载体pPZP35S上,通过农杆菌叶盘转化法转化烟草叶片,经卡那霉素筛选、PCR扩增鉴定证明,SBE-Ⅱb基因已成功转入烟草细胞中,获得4个转基因株系。转基因烟草叶片与野生型比较,颜色变暗,植株较小。RT-PCR半定量和实时荧光定量RT-PCR分析表明,转基因烟草株系的叶片中有SBE-Ⅱb基因的表达,与对照...

• 单位
  石河子大学