H_2O_2诱导的2BS早老细胞中自噬体增多

作者：谢步善; 韩秀丽; 陈丽婷; 何维清; 白俊海; 毛泽斌

来源：中国生物化学与分子生物学报, 2009, 25(08): 753-758.

DOI：10.13865/j.cnki.cjbmb.2009.08.013

• 自噬
• 人胚肺二倍体成纤维细胞
• 早老
• 过氧化氢

自噬在细胞复制性衰老中起着重要的作用.然而,早老细胞中的自噬现象基本无相关的报道.本文通过外源性过氧化氢(H2O2)的诱导,构建人胚肺二倍体成纤维细胞(2BS细胞)早老模型.首先,通过SA-β-gal染色,验证细胞早老;从形态学和特异标志分子及雷帕霉素作用的靶位点(mTOR)信号通路不同角度检测自噬的变化,其中形态学检测包括丹(磺)酰戊二胺(MDC)自噬分子定量法及电镜自噬超微结构的观察;特异标志分子LC3的检测包括GFP-LC3自噬定位法和免疫印迹法检测LC3;及检测mTOR信号通路下游激酶p70S6蛋白的表达变化.结果表明,过氧化氢诱导的早老细胞中自噬体相对年轻细胞明显增多,且具有保护早老细胞的作用.

• 单位
  北京大学