miR-125b通过下调己糖激酶2的表达抑制HOS骨肉瘤细胞有氧糖酵解

作者:吴玉娟; 何华宾; 吴冰; 温军; 郭哲; 罗煜; 曹镐禄
来源:细胞与分子免疫学杂志, 2017, 33(10): 1365-1370.
DOI:10.13423/j.cnki.cjcmi.008455

摘要

目的探讨miR-125b对HOS骨肉瘤细胞有氧糖酵解的影响和机制。方法采用实时定量PCR检测HOSB正常成骨细胞和HOS骨肉瘤细胞中miR-125b的表达水平;采用3H标记的2-脱氧葡萄糖(3H-2DG)法检测细胞葡萄糖摄取率、乳酸定量试剂盒检测细胞上清中乳酸含量,以评价miR-125b模拟物(miR-125b-mimics)对HOS骨肉瘤细胞有氧糖酵解的影响。采用双荧光素酶报告基因实验明确己糖激酶2(HK2)是否为mimics-125b的直接靶分子;采用Western blot法检测mimics-125b对HK2蛋白水平的影响。结果 mimics-125b在HOS骨肉瘤细胞中表达水平显著低于HOSB正常成骨细胞;HOS细胞过表达miR-125b后,糖摄取率和乳酸生成明显减少,有氧糖酵解受到显著抑制;HK2蛋白为miR-125b的直接靶分子;HOS细胞过表达miR-125b后,HK2蛋白表达受到抑制。结论 miR-125b在HOS骨肉瘤细胞中低表达,并通过靶向抑制HK2的表达抑制HOS细胞有氧糖酵解。

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