摘要
目的:从方格星虫中分离和筛选可促进骨形成的生物活性低聚肽。方法:通过酶解法和膜分离法制备寡肽,并通过HPLC-MS/MS鉴定肽段序列。通过在线数据库预测药物形成,并通过斑马鱼模型评估促进骨形成的作用。结果:共鉴定出10种低分子量肽,通过斑马鱼骨发育模型获得了两种潜在的候选肽,其氨基酸序列分别为GFAGDDAPR和GLGGLSPEK;分别命名为GSP1和GSP2;其分子量分别为905.04和857.06 Da;与空白对照组相比,1~50μg/mL GSP1溶液浓度处理的AB斑马鱼幼鱼颅骨积分光密度和绿色荧光的面积均有所增加,GSP1浓度在5μg/mL时促进骨发育的效果最好(P<0.05)。1~50μg/mL GSP2溶液浓度处理的AB型斑马鱼幼鱼颅骨积分光密度和绿色荧光的面积均有所增加,且随着浓度的增加而增大,GSP2浓度在50μg/mL时促进骨发育的效果最好(P<0.05)。结论:小于1000 Da的寡肽有望成为促进骨形成的候选药物。
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单位广东湛江海洋医药研究院; 广东医科大学