RGMa通过Rho激酶调控EAE小鼠IL-27的表达和神经功能

作者：牟春地; 燕伟平; 余刚; 秦新月; 冯金洲

来源：重庆医学, 2021, 50(20): 3421-3425.

• 多发性硬化
• 实验性自身免疫性脑脊髓炎
• RGMa
• Rho激酶
• 白介素-27

目的探讨排斥性导向分子a(RGMa)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠神经功能的影响,以及RGMa调控IL-27的相关分子机制。方法 C57BL/6小鼠分为正常对照组,EAE模型组,RGMa RNAi组(rAd5-shRNA-RGMa重组腺病毒),空载体对照组(空载体rAd5-HK重组腺病毒),Rho激酶抑制剂组和PBS组,每组10只。除正常对照组外均构建EAE小鼠模型,每天行神经功能评分评价小鼠神经功能,造模当天记做免疫第0天,免疫12 d后对RGMa RNAi组、空载体对照组、Rho激酶抑制剂组及PBS组分别给予rAd5-shRNA-RGMa重组腺病毒[(2.51×10~(10))pfu/mL,6μL]、空载体rAd5-HK重组腺病毒[(2.51×10~(10))pfu/mL,6μL]、Rho激酶特异性抑制剂Y-27632(按体质量10 mg/kg)、等体积PBS干预,正常对照组及EAE模型组无其他干预。免疫18 d后行Western blot检测血清RGMa及Rho激酶的表达水平,ELISA检测血清IL-27的表达。结果 Western blot结果显示RGMa RNAi组小鼠RGMa及Rho激酶表达较EAE模型组显著降低(0.07±0.01 vs. 0.58±0.09,P<0.001;42.98±5.69vs.66.74±8.35,P=0.027)。神经功能评分示RGMa RNAi组小鼠起病时间较EAE模型组及空载体对照组明显推迟,神经功能损伤明显减轻(P<0.05或P<0.01)。ELISA结果显示,与EAE模型组(1 145.36±134.45)比较,RGMa RNAi组(658.46±83.41,P=0.004)及Rho激酶抑制剂组(804.45±133.90,P=0.019)IL-27表达水平显著降低,与PBS组(1 060.73±104.54)比较,Rho激酶抑制剂组IL-27表达水平显著降低(P=0.022)。结论特异性抑制EAE小鼠RGMa可显著缓解其神经功能损伤,抑制IL-27的表达水平,这一作用可通过Rho激酶介导。

• 单位
  重庆医科大学附属第一医院; 广饶县人民医院; 重庆市綦江区人民医院; 神经内科