摘要
目的探讨过表达整合素连接激酶(ILK)与胶质瘤细胞对替莫唑胺(TMZ)敏感性的影响。方法本研究前期已经构建了重组质粒pEGFP-C1-ILK,并将其转染给SHG-44胶质瘤细胞,筛选出了稳定转染的细胞株。本实验分组如下:SHG-44组、pEGFP-C1+DMSO组、pEGFP-C1-ILK+DMSO组、pEGFP-C1+TMZ组、pEGFP-C1-ILK+TMZ组,应用试剂盒法检测凋亡关键酶Caspase-3的活性,并应用Hoechst法和流式细胞术检测各组细胞的凋亡。结果 Caspase-3的活性在pEGFP-C1-ILK+TMZ组明显低于pEGFPC1+TMZ组(P=0.007 8),pEGFP-C1-ILK+DMSO组中Caspase-3活性与pEGFP-C1+DMSO组比较同样明显降低(P=0.008 3),pEGFP-C1+DMSO组与SHG44组Caspase-3活性比较,差异无统计学意义(P=0.845)。Hoechst法结果:SHG44组与pEGFP-C1+DMSO组中的凋亡细胞,差异无统计学意义(P=0.87),而pEGFP-C1-ILK+TMZ组凋亡细胞明显少于pEGFP-C1+TMZ组(P=0.003),pEGFP-C1-ILK+DMSO组与pEGFP-C1+DMSO组比较,凋亡细胞差异无统计学意义(P=0.92)。流式细胞术结果:pEGFP-C1-ILK+TMZ组与pEGFP-C1+TMZ组比较,早期凋亡细胞百分比明显减少(P=0.001),pEGFP-C1+ILK+DMSO组与pEGFP-C1+DMSO组比较,早期凋亡细胞百分比差异有统计学意义(P=0.005 2),pEGFP-C1+DMSO组与SHG44组早期凋亡细胞百分比相比较,差异无统计学意义(P=0.74)。结论过表达ILK通过降低Caspase-3的酶活性减少胶质瘤细胞的凋亡,从而降低胶质瘤细胞对TMZ的敏感性。
- 单位