摘要
建立一种利用环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification, LAMP)快速检测沙眼衣原体的方法。针对沙眼衣原体gyr A基因设计LAMP特异引物,并加入一条环引物LB提高反应效率,对反应的特异性、灵敏度和重复性进行评价,同时用沙眼衣原体阳性的临床样本进行LAMP检测验证。实时荧光LAMP结果表明,建立的LAMP方法特异性好,不与10种常见的病原微生物以及生殖道感染相关细菌发生非特异反应,灵敏度可以达到4.13×101 copies/μL;20次重复试验的Cq值变异系数为7.23%,反应稳定性良好;用LAMP方法对6份临床阳性样本进行检测,阳性符合率为100%。因此,该研究建立的沙眼衣原体LAMP检测方法快速、灵敏、稳定性好,能为感染筛查和早期诊断提供参考。
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单位成都市食品药品检验研究院; 四川大学华西医院; 四川大学华西第二医院; 生命科学学院; 天津红日药业股份有限公司; 四川大学; 生物资源与生态环境教育部重点实验室