摘要
目的比较取自膝骨关节炎不同病变程度部位的软骨细胞的基因和表型变化。方法临床获取人骨关节炎关节软骨组织,分别分离不同损伤程度部位的骨关节炎软骨细胞。将细胞分为2组,取自相对正常部位的软骨细胞(A组)和取自病变部位的软骨细胞(B组)。隔日予细胞更换培养液1次,分别于培养第2天和第4天,倒置显微镜观察细胞形态的变化;Alcian蓝染色方法检测软骨细胞内蛋白多糖的分泌;碱性磷酸酶(ALP)染色方法检测细胞内ALP的分泌;实时聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测细胞内Col2、Aggrecan、ALP和基质金属蛋白酶13(MMP-13)等因子m RNA的表达。结果在培养后第2天和第4天,A组细胞Alcian蓝染色强度均强于B组,但两组细胞染色强度均随时间逐渐减弱;A组细胞ALP染色强度均弱于B组,但两组细胞染色强度均随时间逐渐增强;A组细胞Col2和Aggrecan因子基因表达均高于B组(P<0.05),但两组细胞内Col2基因表达均随时间逐渐降低;A组细胞ALP和MMP-13因子基因表达均高于B组(P<0.05),但两组细胞内2基因表达均随时间逐渐增高。结论取自膝骨关节炎病变部位的软骨细胞与取自相对正常部位的软骨细胞相比,更具有成熟分化的特征,但两组细胞都具有自发性成熟分化的特征。
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单位中国医科大学附属盛京医院