3种蚊媒病毒荧光PCR检测方法的建立

作者：王红; 李晓宾; 李君萍; 王文娟; 郭红丽; 杨玉^*

来源：中国口岸科学技术, 2023, 5(12): 92-96.

• 蚊媒病毒
• 登革病毒
• 寨卡病毒
• 西尼罗病毒

本研究拟建立一种多重荧光PCR检测技术，可同时检测登革病毒（Dengue virus,DENV）、寨卡病毒（Zika virus,ZIKV）和西尼罗病毒（West Nile virus,WNV）。通过设计上述3种病原体的特异性引物，优化荧光PCR反应体系和扩增条件，再对多重荧光PCR反应体系的特异性、灵敏度和重复性进行验证。实验结果显示，建立的多重荧光PCR方法的引物和探针终浓度分别为600 nmol/L和400 nmol/L，退火温度为60℃；其最低检测限浓度为1.0×103拷贝/mL，具有较好的特异性和重复性，病原体之间无交叉反应。本研究所建立的多重荧光PCR检测方法可用于登革病毒、寨卡病毒和西尼罗病毒的定性检测，为蚊媒传染病的检测提供重要技术支持。