新型伪狂犬病病毒gB、gC蛋白串联表达及免疫活性分析

作者：吴学敏; 陈如敬; 陈秋勇; 王隆柏; 车勇良; 严山; 刘玉涛; 周伦江^*

来源：中国动物传染病学报, 2022, 30(05): 60-65.

DOI：10.19958/j.cnki.cn31-2031/s.20211129.001

• 伪狂犬病病毒
• gB蛋白
• gC蛋白
• 串联表达
• 免疫活性

为研究新型PRV毒株主要抗原表位，并获得具有良好免疫原性的表位串联体，本研究通过扩增新型PRV FJ-2012株gB、gC蛋白基因片段，经密码子优化后构建串联表达序列，并链接原核表达载体pET-28a(+)克隆位点，转化至BL21(DE3)感受态细胞，利用IPTG诱导表达获得gBC串联蛋白，并用间接ELISA法测定其兔多克隆抗体血清效价，通过Western blot、间接免疫荧光试验评价其免疫活性。结果表明成功构建了PRV-gBC串联蛋白表达体系，并获得新型PRV FJ-2012株gBC串联重组蛋白；ELISA检测其克隆抗体血清效价可以达到1∶6400，Western blot试验显示gBC串联蛋白与多抗血清能产生特异性反应，免疫荧光试验说明克隆抗体血清能与FJ-2012株抗原发生免疫反应。本研究串联表达的新型PRV FJ-2012株gB、gC跨膜区域蛋白具有良好的免疫活性，为进一步研究新型PRV优势抗原表位奠定了基础。

• 单位
  福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心; 福建省农业科学院