摘要

目的应用同源重组的方法构建以hTERT和Cox-2启动子调控增殖的肿瘤特异性增殖腺病毒。方法将hTERT和Cox-2启动子从人类白细胞基因组中亚克隆出来,并将启动子分别插入到腺病毒穿梭载体pd306上的E 1A和E 1B基因前,使hTERT和Cox-2启动子分别调控腺病毒必须基因E 1A和E 1B的表达,再将构建后的pd306和腺病毒的骨架质粒BHGE 3在A d293细胞内进行同源重组,并用重组后的病毒感染H e la细胞检测病毒对肿瘤细胞的杀伤力。结果成功构建了hTERT和Cox-2启动子,并将两个启动子连接入腺病毒载体,产生了具有感染力的可增殖腺病毒。结论经hTERT和Cox-2启动子调控增殖的肿瘤特异性增殖腺病毒对H e la细胞具有杀伤力,为进一步研究病毒在体内、外对各种肿瘤细胞的特异性杀伤力、安全性奠定了基础。

  • 单位
    浙江大学医学院附属第一医院