摘要
目的探讨逆转素(reversine)对人肝癌细胞HepG2细胞增殖、克隆形成和凋亡的影响。方法人肝癌细胞HepG2经不同浓度reversine(0.1~1.6μmol·L-1)处理后,应用MTS法检测其对细胞增殖能力的影响;克隆形成实验评估reversine作用于肝癌细胞HepG2的远期效应;流式细胞术Annexin V-FITC/PI双染法检测reversine处理后肝癌细胞HepG2的凋亡率;Western blot法检测凋亡相关蛋白PARP、Bax、Bcl-2及Bcl-xL表达水平的变化。结果与对照组(DMSO)相比,不同浓度reversine对人肝癌细胞HepG2的增殖均有抑制作用(P<0.05),且呈剂量依赖关系,IC50为0.94μmol·L-1。Reversine可以明显抑制Hep G2细胞的克隆形成能力(P <0. 05),且较高浓度reversine处理后,Hep G2细胞几乎不能形成肉眼可见的细胞克隆; reversine可以诱导Hep G2细胞凋亡(P <0. 05),且细胞的凋亡率与reversine的浓度呈正相关; Western blot结果显示,reversine孵育48 h后,Hep G2细胞中活化PARP、Bax的表达明显上调;同时,Bcl-2及Bcl-xL蛋白的表达下降。结论 Reversine可以明显抑制人肝癌细胞Hep G2细胞的增殖和克隆形成能力,并且可诱导Hep G2细胞的凋亡,其诱导凋亡与线粒体凋亡途径相关。
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单位皖南医学院弋矶山医院; 厦门大学附属东方医院