miR-34a通过调控SESN2表达促进耳蜗毛细胞凋亡的机制

作者：哈再古丽·贾汉; 阿依恒·曲库尔汗^*; 冯娟; 阿不都许库尔·吾买尔

来源：西部医学, 2021, 33(04): 487-492.

• miR-34a
• SESN2
• HEI-OC1
• 细胞凋亡
• 氧化损伤

目的探讨miR-34a通过调控SESN2的表达促进耳蜗毛细胞(HEI-OC1)凋亡的机制。方法双萤光素酶报告基因实验检测miR-34a与SESN2靶向相关性;分别构建对照组(NC组)、SESN2过表达组(SESN2组)、共转染SESN2过表达载体及miR-34a mimic组细胞(SESN2+miR-34a mimic组)。应用CCK-8、Annexin V-FITC/PI流式细胞术和ELISA实验分别检测各组HEI-OC1细胞增殖、凋亡及细胞内氧化应激因子表达的变化,WB检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax与caspase-3及AMPK信号通路中AMPK磷酸化及SIRT1蛋白表达的变化。结果共转染miR-34a mimic与pGL3-PIK3CA-SESN2-WT后,细胞内萤光素酶活性受到显著抑制;与NC组相比,SESN2组细胞的增殖能力明显增加,而凋亡率显著降低,而SESN2+miR-34a mimic组细胞的增殖及凋亡均无明显变化,提示过表达miR-34a会削弱SESN2对HEI-OC1细胞的保护作用。同时,与NC组相比,SESN2组细胞中凋亡抑制蛋白Bcl-2与SIRT1、p-AMPK/AMPK蛋白相对表达量增加,抑制凋亡蛋白Bax、caspase-3表达,同时细胞内抗氧化应激因子SOD、CAT及GSH-Px表达量随SESN2增加而升高,MDA表达量减少,反之共转染miR-34a mimic能够逆转上述分子表达变化。结论 miR-34a可能通过靶向抑制SENS2表达,促进AMPK/SIRT1信号通路激活、加速细胞内氧化损伤发挥对HEI-OC1细胞凋亡的促进作用。

• 单位
  新疆医科大学; 新疆医科大学第一附属医院