一株高产纳豆激酶菌株的鉴定与分析

作者：王雪妍; 孙玉飞; 冯菲; 陈晓飞; 李锋; 周伏忠

来源：生物技术通报, 2016, 32(01): 187-194.

DOI：10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2016.01.030

• 枯草芽孢杆菌枯草亚种
• 纳豆激酶
• 菌株鉴定

鉴定高产纳豆激酶菌株Td,分析纳豆激酶的分子特征。利用菌体形态、生理生化特征、以及分子生物学方法对菌株Td进行鉴定;并采用MALDI-TOF质谱测定与分析、SDS-PAGE和纤溶活性测定等方法检测纳豆激酶特性,利用PCR方法扩增纳豆激酶的基因全长。结合菌体形态、生理生化特征和16S r DNA、gyr A基因序列、DNA-DNA杂交率等实验结果,鉴定菌株Td为枯草芽孢杆菌枯草亚种(Bacillus subtilis subsp.subtilis);菌株Td发酵产生的纳豆激酶产量可达300 mg/L以上,占发酵液总蛋白的40%以上;纤溶活性达230 U/m L以上;氨基酸序列与subtilisin E的序列相似性最高;基因全长序列为1 143 bp。枯草芽孢杆菌枯草亚种Td是一株高产、高活性纳豆激酶的产生菌,具有优良的工业化开发价值。

• 单位
  河南省科学院生物研究所有限责任公司