摘要
目的应用无血清培养基(serum free medium,SFM)初步富集肿瘤耐药细胞,筛选出结外NK/T细胞淋巴瘤(extranodal NK/T-celllymphoma,ENKTCL)的敏感药物。方法应用加入10%人血清和700U/mL人白细胞介素-2(interlukin-2,IL-2)的1640培养基和加入700U/mL人IL-2的SFM VIVO-15TM,分别培养SNK-6细胞;MTT法分别检测2种培养体系中表柔比星(adriamycin,ADM)、奥沙利铂(oxaliplatin,L-OHP)、吉西他滨(gemcitabine,GEM)、左旋门冬酰胺酶(L-Asparaginase,L-ASP)、阿糖胞苷(cytosine arabinoside,Ara-C)和甲氨蝶呤(methotrexate,MTX)等药物作用的IC50;2种培养体系中分别加入上述各种药物作用32h后,7AAD/PE-AnnexinⅤ染色法流式细胞术检测各处理组细胞的凋亡率,并分析比较。结果无血清培养体系中细胞部分悬浮生长,每个悬浮球由>50个数目不等的细胞组成,悬浮球体积较有血清中明显增大。有血清和SFM中IC50含量,ADM分别为(0.12±0.018)和(0.751±0.14)μg/mL,P<0.001;Ara-C分别为(0.217±0.002)和(0.822±0.028)μg/mL,P<0.001;MTX分别为(0.023±0.001)和(0.032±0.002)μg/mL,P=0.002。药物作用后,有血清和SFM中SNK-6细胞的凋亡率,ADM分别为(45.23±2.58)%和(30.91±2.13)%,P=0.041;Ara-C分别为(56.12±2.32)%和(41.47±2.46)%,P=0.034;MTX分别为(24.42±1.92)%和(13.01±2.28)%,P=0.045;GEM分别为(15.05±2.05)%和(41.45±1.74)%,P<0.001。结论SFM VIVO-15TM可用于ENKTCL SNK-6细胞培养;无血清培养后的SNK-6细胞对ADM、Ara-C和MTX耐药性增强,对L-OHP、GEM和L-ASP敏感。
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单位河南省肿瘤医院; 郑州大学