同型半胱氨酸通过上调Rap1a诱导小鼠小胶质细胞炎性极化

作者：韦爱君; 贺杜鹃; 张梅奎^*

来源：中国病理生理杂志, 2023, 39(12): 2242-2250.

• 同型半胱氨酸
• Ras相关蛋白1a
• 小胶质细胞
• M1型极化
• 炎症

目的：研究不同浓度同型半胱氨酸（homocysteine, Hcy）对BV2小鼠小胶质细胞介导的炎症反应的影响，探讨Ras相关蛋白1a(Ras-related protein 1a, Rap1a)在Hcy诱导的BV2细胞炎症反应中的作用机制。方法：体外培养小鼠小胶质细胞系BV2细胞，用Hcy干预，建立高同型半胱氨酸血症细胞模型，将细胞分成空白对照组、50μmol/L Hcy组、100μmol/L Hcy组和150μmol/L Hcy组，采用RT-qPCR法检测BV2细胞M1型极化标志物、炎症因子（IL-6、IL-1β和TNF-α）及Rap1a的mRNA表达水平，ELISA法检测BV2细胞炎症因子IL-6、IL-1β和TNF-α的含量；Western blot法检测细胞内Rap1a的蛋白表达水平。进一步利用慢病毒转染过表达和敲减Rap1a对其功能加以验证。结果：100μmol/L以上浓度Hcy干预下，BV2细胞发生炎性极化，M1型极化标志物CD80和CD86 mRNA表达升高（P<0.05）;IL-6、IL-1β和TNF-α等炎症因子mRNA及蛋白表达显著上调（P<0.05）;Rap1a蛋白及mRNA表达水平均显著升高（P<0.05）;Rap1a mRNA水平与CD80 mRNA及IL-1β和TNF-α含量均呈明显正相关（P<0.05）。过表达Rap1a和敲减Rap1a慢病毒的感染复数均为80，荧光显微镜观察可达有效转染率，过表达Rap1a加剧了Hcy诱导的BV2细胞炎性极化（P<0.05）；敲减Rap1a可抑制Hcy诱导的BV2细胞炎性极化（P<0.05）。结论：Hcy可促进BV2小鼠小胶质细胞M1型极化、介导炎症反应。Rap1a可能是Hcy诱导BV2细胞炎症反应的重要调节因子。

• 单位
  第一临床医学院; 解放军总医院; 陕西中医药大学