B7-H3分子在肝癌组织中NK细胞上的表达及对NK细胞杀伤人肝癌细胞能力的影响

作者：林思敏; 张东泽; 谢金晶; 金海艳; 徐如嫣; 丁祥林^*; 张光波^*

来源：免疫学杂志, 2022, 38(10): 901-908.

DOI：10.13431/j.cnki.immunol.j.20220126

• NK细胞
• 原发性肝癌
• B7-H3
• B7-H3阻断抗体MIH35

目的 探讨B7-H3在肝癌组织中NK细胞上的表达特征及对NK细胞杀伤人肝癌细胞的影响和机制。方法 收集肝血管瘤患者正常肝组织和外周血标本(对照组)以及肝癌患者肿瘤组织和外周血标本(实验组)，通过流式细胞术分析上述样本中CD45+CD3-CD56+NK细胞的比例及NK细胞上B7-H3的表达水平，并结合临床参数分析临床意义；用CCK-8法检测B7-H3对NK细胞杀伤人肝癌细胞HepG2能力的影响；用CBA和ELISA法检测NK细胞与HepG2共培养时，B7-H3对NK细胞分泌IFN-γ、穿孔素、颗粒酶B的影响；利用Western blot分析B7-H3对NK细胞p38/ERK、NF-κB信号通路蛋白的影响。结果 与对照组外周血相比，肝癌患者外周血白细胞中NK细胞的比例显著上升(P<0.05)，但NK细胞上B7-H3的表达没有统计学差异(P>0.05)；与对照组肝组织相比，肝癌患者肿瘤浸润白细胞中NK细胞的比例显著下降(P<0.05),NK细胞的上B7-H3的表达显著上升(P<0.05)；与肿瘤发展程度低的患者相比，肿瘤发展程度高的肝癌患者肿瘤浸润白细胞中NK细胞的比例更低(P<0.05)，但NK细胞上B7-H3的表达更高(P<0.05)；肿瘤浸润白细胞中NK细胞的比例及NK细胞上B7-H3的表达情况在不同性别、不同年龄或不同甲胎蛋白表达情况的肝癌患者之间均没有统计学差异(P>0.05)；和HepG2共培养时，与对照组(IgG2a)相比，阻断B7-H3实验组(MIH35)NK92细胞IFN-γ、穿孔素、颗粒酶B的分泌水平显著下降(P<0.05)，杀伤能力显著下降(P<0.05)；利用Western blot进一步研究机制发现，与IgG2a组相比，MIH35组NK92细胞ERK1/2、p38、p65的磷酸化蛋白相对表达水平均显著下降(P<0.05)。结论 B7-H3在肝癌患者肿瘤浸润NK细胞上高表达，且与肿瘤进展有关，能促进NK细胞对人肝癌细胞杀伤，表明B7-H3在未来肝癌的治疗中具有潜在价值。

• 单位
  苏州永鼎医院; 苏州大学; 苏州大学附属第一医院