荸荠基因组DNA的提取及RAPD反应体系的建立(英文)

作者：江文; 陈丽娟; 李杨瑞; 杨丽涛

来源：广西农业科学, 2009, 40(03): 229-232.

• 荸荠
• 基因组DNA
• 提取
• RAPD
• 反应体系 water chestnut(Eleocharis tuberose Roem et Schult)
• genomic DNA
• extraction
• reaction system

以荸荠叶状茎为试验材料,采用改良的SDS法提取其基因组DNA,并对其RAPD反应体系进行优化,建立了荸荠的RAPD-PCR优化反应体系和程序。结果表明,提取的基因组DNA纯度和完整性较好,OD260/OD280值在1.8～2.0之间,DNA无降解现象,完全可以满足RAPD-PCR扩增要求。建立了荸荠RAPD反应体系:总体积为25μl,各有关成分的最佳浓度分别为25mmol/L Mg2+,1.0U Taq DNA聚合酶,0.2mmol/L dNTPs,1μmol/μl引物,1.5ng/μl DNA模板。PCR反应程序为:94℃预变性3min;94℃变性1min,37℃退火30s,72℃延伸60s...

• 单位
  广西大学; 广西作物遗传改良生物技术重点开放实验室; 广西壮族自治区农业科学院生物技术研究所