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摘要
目的 基于mTOR通路介导的自噬探讨补阳还五汤对脊髓损伤(SCI)后自噬相关蛋白的影响，从而揭示补阳还五汤对SCI的保护机制。方法 64只SPF级SD雄性大鼠，随机分为假手术组、模型组、雷帕霉素组、补阳还五汤组。除假手术组外，其余三组均采用Allen’s打击方法制备SCI模型。假手术组、模型组予生理盐水灌胃，补阳还五汤组予补阳还五汤水煎液灌胃(12.73g·kg-1·d-1),在造模前各组分别予相应处理持续3d,雷帕霉素组在造模后0.5h内给予腹腔注射给药(3mg·kg-1·d-1);造模3 h、6 h后采用改良Tarlov评分、HE染色、免疫组化实验、免疫印迹实验方法，观察补阳还五汤对下肢运动功能、脊髓前角区神经元的形态结构及mTOR自噬信号通路的影响。结果 (1)与假手术组比，造模后3 h、6 h时模型组改良Tarlov评分均显著降低，神经元细胞肿胀、胞核固缩严重，细胞结构完整性丧失，Beclin1、LC3阳性细胞，LC3-II/LC3-I、Beclin1蛋白表达均减少(P<0.05),mTOR阳性细胞及蛋白均表达增加(P<0.05);(2)与模型组比，造模后3 h、6 h时雷帕霉素组、补阳还五汤组改良Tarlov评分均显著降低(P<0.05),神经元细胞肿胀略有减轻，偶尔可见正常的神经元细胞，两组组Beclin1、LC3阳性细胞及LC3-II/LC3-I、Beclin1蛋白表达均升高(P<0.05),mTOR阳性细胞及蛋白表达均减少(P<0.05);(3)与雷帕霉素组比，造模后3 h、6 h时补阳还五汤组改良Tarlov评分差异均无统计学意义(P>0.05),细胞肿胀略减轻、正常神经元稍微增多，造模后3 h时Beclin1阳性细胞，6 h时LC3阳性细胞表达均升高(P<0.05),造模后3h、6 h时LC3-II/LC3-I、Beclin1、mTOR蛋白表达增加(P>0.05)。结论 补阳还五汤可以有效地影响细胞自噬水平，改善大鼠下肢运动功能，有效地调控mTOR信号通路，其保护作用可能是通过抑制mTOR信号通路激活细胞自噬而实现的，这可能是其治疗SCI的作用机制之一。
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