稳定表达荧光素酶的人乳腺癌MCF-7细胞的构建

作者：夏敏杰; 缪建成; 胡晶莹; 王玉柱; 田芳; 杨明俊; 杨威; 李卫华; 王晓东^*

来源：毒理学杂志, 2022, 36(02): 142-146.

DOI：10.16421/j.cnki.1002-3127.2022.02.008

• MCF-7细胞
• 荧光素酶
• 潮霉素B
• 生物发光

目的 构建稳定表达荧光素酶的人乳腺癌MCF-7细胞株。方法 采用脂质体转染法将荧光素酶基因导入MCF-7细胞，经潮霉素B筛选建立稳定表达荧光素酶的MCF-7-Luc细胞株；将不同数量MCF-7-Luc细胞分别接种于黑色96孔板(细胞数量59～30 000)和裸鼠皮下(细胞数量2.44×103～5×106),IVIS Lumina Ⅲ成像系统体外培养细胞以及裸鼠体内荧光素酶表达效率。结果 筛选得到稳定表达荧光素酶的MCF-7-Luc细胞；IVIS Lumina Ⅲ成像系统检测结果表明，不论是体外培养的细胞或是裸鼠体内，生物发光强度与接种的细胞数量之间均存在明显的线性关系(体外y=129.32x-26409,R2=0.9922,P<0.05;体内y=106.82x+1E+07,R2=0.9404,P<0.05)。结论 成功构建了稳定表达荧光素酶的MCF-7-Luc细胞，为研究乳腺癌的发生发展、肿瘤微环境以及抗乳腺癌药物的筛选提供必要条件。

• 单位
  上海实验动物研究中心