基于环介导等温扩增的志贺菌快速检测方法的建立

作者：欧红玲; 王岩; 白静; 张巧云; 贾连玲; 李梦文; 冯鑫鑫; 王欣茹^*

来源：标记免疫分析与临床, 2021, 28(05): 847-852.

• 环介导等温扩增
• 志贺菌
• 快速检测

目的建立基于环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification, LAMP)技术的志贺菌快速检测方法。方法针对志贺菌特异保守ipaH基因设计引物,通过引物筛选和反应条件优化,建立检测志贺菌的实时荧光及肉眼目视观测结果的LAMP方法,对方法的检出限、有无交叉反应、符合率和抗干扰能力进行评价。结果 60～65℃等温条件下30min内可完成LAMP反应。荧光和肉眼目视观察结果检出限分别为211和21.1 fg/μL,与22种非志贺菌无交叉反应。检测35份志贺菌污染的样品和30份未污染标品,荧光和肉眼目视检测阳性符合率分别为97.1%和94.3%,阴性符合率均为100%,总符合率分别为98.5%和96.9%。方法具备良好的抗干扰能力。结论在基层医院、灾区救治、感染事件现场,环境、设备和人员受限等条件下,建立的实时荧光和肉眼目视观察结果的LAMP方法可为志贺菌快速检测提供有力手段。