摘要
本发明涉及一种用于牛奶中大肠杆菌的比色检测方法,属于食品安全技术领域。本发明中双链探针是由适配体和目标DNA杂交而成,双链探针中的适配体与目标菌特异性结合,释放出目标DNA与发夹探针杂交,在核酸外切酶III的作用下,指数级扩增目标DNA。扩增的目标DNA置换出多壁碳纳米管复合材料上的催化探针,通过磁吸附碳纳米管复合材料后,上清液中掺氯化钾的木质素碳点催化过氧化氢生成羟基自由基,进而氧化无色的底物3,3′,5,5′-四甲基联苯胺形成蓝色产物,实现大肠杆菌O157:H7的可视化检测。本发明减小了样品基质干扰、成本低、催化特性稳定,通过核酸外切酶III辅助扩增技术搭配新型碳纳米酶,使可视检出限进一步提高至10~2cfu/mL,具有非常良好的推广前景。
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