腺病毒介导的HBsAg基因修饰树突状细胞瘤苗的制备

作者：杨静悦; 曹大勇; 刘文超; 贾军; 斯小明; 腾增辉; 杨文涛

来源：现代肿瘤医学, 2006, (12): 1495-1498.

• 树突状细胞
• 腺病毒载体
• HBsAg
• 转染 dendritic cells
• recombinant adenovirus vector
• HBsAg
• infected

目的:构建含人HBsAg基因的腺病毒载体,体外转染树突状细胞,制备树突状细胞肝癌瘤苗。方法:将HBsAg基因亚克隆到pIND载体和Shuttle2载体中,构建穿梭载体Shuttle2-S。用PI-SceⅠ和I-CeuⅠ双酶切后将所获HBsAg基因片段再与线性化的腺病毒载体pAdeno-X连接,构成pAdeno-S重组腺病毒载体。其后,用重组腺病毒载体转染HEK293细胞,包装腺病毒表达载体。通过酶切、PCR对腺病毒载体进行鉴定。包装好的重组病毒载体pAdeno-S体外感染树突状细胞制备树突状细胞肝癌瘤苗后Westernblot法检测其表达,流式细胞仪检测其能否诱导树突状细胞凋亡。结果:酶切、P...

• 单位
  西京医院; 陕西省肿瘤医院; 第四军医大学