STAT3在对乙酰氨基酚所致小鼠肝损伤后肝细胞再生中的作用

作者：余旺; 章礼久^*; 路燕^*; 宋莎莎

来源：临床肝胆病杂志, 2021, 37(04): 857-862.

• 化学性与药物性肝损伤
• STAT3转录因子
• 醋氨酚
• 肝再生

目的探讨STAT3在对乙酰氨基酚(APAP)致小鼠肝细胞损伤后肝细胞增殖中的作用。方法体外培养小鼠正常肝细胞AML12,APAP(1、2.5、5、10、20 mmol/L)刺激12、24或48 h,等体积PBS作为对照组。筛选出最佳刺激浓度和作用时间后,AG490(10、50、100μmol/L)作用AML12。CCK8法检测AML12细胞活力。RT-PCR检测AML12中PCNA、CyclinD1、Ki67的m RNA表达水平。Western Blot法检测STAT3、p-STAT3及PCNA、CyclinD1表达水平。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果 APAP作用24 h及48 h后,与对照组比较,各浓度组AML12细胞活力均降低(P值均<0.05); APAP浓度为2.5 mmol/L时,细胞活力分别为0.717±0.027、0.752±0.014,与对照组比较差异均有统计学意义(P值均<0.05),能够满足后续实验条件。与对照组比较,24 h APAP(2.5 mmol/L)组PCNA、CyclinD1及Ki67 m RNA的表达均降低(P值均<0.01);与24 h APAP组比较,48 h APAP(2.5 mmol/L)组PCNA、CyclinD1及Ki67 m RNA的表达均升高(P <0.01),因此选择APAP 2.5 mmol/L、刺激时间48 h来模拟体外损伤AML12细胞后肝细胞再生的模型。加入AG490,与对照组比较,10、50μmol/L AG490组细胞活力变化无统计学意义,余各组细胞活力均降低(P值均<0.01);与APAP组比较,AG490(50μmol/L)+APAP组和AG490(100μmol/L)+APAP组细胞活力降低(P值均<0.01),因此选择50μmol/L AG490作为后续实验处理浓度。与对照组比较,APAP组p-STAT3的蛋白水平升高(P <0.01),而AG490组、APAP+AG490组降低(P值均<0.05);与APAP组比较,APAP+AG490组PCNA、CyclinD1蛋白水平及PCNA、CyclinD1、Ki67 m RNA表达均降低(P值均<0.05)。结论 STAT3参与APAP诱导小鼠肝细胞损伤后的细胞增殖,而AG490作为STAT3抑制剂通过抑制STAT3磷酸化从而抑制APAP肝损伤后肝细胞增殖。

• 单位
  安徽医科大学第二附属医院