摘要
目的探讨抑制中人滋养层细胞表面抗原2(human trophoblast cell-surface antigen 2,Trop2)基因表达对舌鳞状细胞癌(tongue squamous cell carcinoma,TSCC)细胞增殖、凋亡的影响及机制,以期为预防和治疗TSCC提供依据。方法选取2014年2月至2016年5月于郑州大学第一附属医院口腔颌面外科行TSCC根治手术的患者46例,实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测TSCC组织及相应癌旁组织中Trop2 mRNA及蛋白表达。分别用阴性对照小干扰RNA (阴性对照小干扰RNA组)、Trop2小干扰RNA(Trop2小干扰RNA组)转染CAL-27细胞,另设空白对照组,转染48 h后行蛋白质印迹法检测Trop2、Ki-67增殖指数、细胞周期蛋白D1、裂解胱天蛋白酶3、Notch1蛋白和Hes 1蛋白表达,细胞计数法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡率。结果TSCC中Trop2基因mRNA(5.72±1.13)及蛋白(0.77±0.06)表达均显著高于癌旁组织(分别为0.92±0.15、0.11±0.01)(P<0.05);转染Trop2小干扰RNA后CAL-27细胞中Trop2的蛋白表达(0.08±0.01)显著低于空白对照组(0.46±0.05),Trop2小干扰RNA组细胞存活率[(64.28±4.12)%]、S期细胞[(14.54±1.02)%]、Ki-67蛋白(0.12±0.01)、细胞周期蛋白D1 (0.04±0.01)表达均显著低于空白对照组[分别为(100.00±1.02)%、(27.33±1.11)%、0.24±0.02及0.20±0.02]和阴性空白对照小干扰RNA组[分别为(96.55±2.43)%、(26.67±1.23)%、0.26±0.03及0.21±0.02],细胞凋亡率(23.55±1.45)%、G0/G1期细胞[(72.32±0.94)%]及裂解胱天蛋白酶3(0.16±0.02)、Notch1蛋白(0.62±0.06)、Hes1蛋白(0.50±0.05)表达均显著高于空白对照组和阴性对照小干扰RNA组(P均<0.05)。结论抑制TSCC细胞中Trop2基因表达可降低癌细胞增殖,阻滞细胞于G1期并促进细胞凋亡,与上调Notch1信号通路相关。
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