细胞浆中PrP蛋白的表达及其细胞毒性作用的研究

作者：王新; 董辰方; 石琦; 石崧; 王桂荣; 雷艳君; 安润; 徐琨; 姜慧英; 韩俊; 赵玉军; 董小平

来源：病毒学报, 2008, (04): 277-281.

DOI：10.3321/j.issn:1000-8721.2008.04.006

• 朊病毒
• 胞浆PrP
• 细胞毒作用
• 蛋白酶抗性

为了探讨在胞浆中表达的PrP的理化特征以及对细胞活性的影响,我们构建了胞浆型PrP(CytoPrP)真核表达质粒,瞬时转染人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞,通过蛋白酶敏感性实验检测CytoPrP及其蛋白酶抗性,利用MTT和Trypan Blue细胞计数检测CytoPrP的细胞毒性作用。结果显示,CytoPrP在胞浆内的存在受蛋白酶抑制剂的控制;与野生型PrP相比,CytoPrP具有相对较强的蛋白酶K(PK)抗性。MTT和细胞计数实验均显示,Cyto-PrP的存在可诱导明显的细胞毒性效应,而CytoPrP的细胞毒性作用受蛋白酶抑制剂含量的影响,呈剂量依赖关系。上述结果为研究CytoPrP在朊病毒病的发病机制中的意义提供了一定的科学数据。

• 单位
  传染病预防控制国家重点实验室; 沈阳农业大学; 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所