摘要

目的·探索细胞核因子κB受体激活蛋白配体(receptor activator of nuclear factor-κB ligand,RANKL)/核因子κB受体激活蛋白(receptor activator of nuclear factor-κB,RANK)系统及Notch通路间的交互调控机制。方法·通过RANKL (35 ng/L)刺激RAW264.7小鼠破骨细胞前体细胞系,用real-time PCR、Western blotting检测Notch通路关键分子的表达水平。小干扰RNA(small interfering RNA,si RNA)技术抑制Notch通路中Notch1、Dll1和Dll3分子的表达,检测上述分子抑制后Rank mRNA和蛋白表达的变化。结果·RANKL刺激引起Notch1、Jagged1、Jagged2的表达降低,Dll4的表达升高。RANKL抑制Notch通路下游分子Hes1、Hey1的表达。通过si RNA技术,Notch1、Dll1和Dll3 mRNA的表达分别下调71%(P=0.000)、53%(P=0.015)和70%(P=0.000)。Notch1表达抑制后,Rank m RNA和蛋白的表达均增加(P=0.003,P=0.000)。结论·Notch1对RANKL-RANK系统的潜在调节机制,可能在破骨细胞相关的溶骨活动中发挥重要作用。

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