基质金属蛋白酶-2和-9基因同时沉默抑制喉癌侵袭生长的实验研究

作者：孙亚男; 杨宝峰; 刘鸣; 郭彦玲; 田霖丽; 焦慧

来源：中华医学杂志, 2008, (01): 36-39.

DOI：10.3321/j.issn:0376-2491.2008.01.011

• 慢病毒属
• 喉肿瘤
• 基质金属蛋白酶

目的探讨重组慢病毒介导的基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)基因同时沉默对喉鳞癌侵袭生长的抑制作用。方法采用核糖核酸(RNA)干扰技术,运用MMP-2和 MMP-9基因小干扰 RNA(siRNA)的重组慢病毒(MMP-2-RNAi-lentivirus,MMP-9一RNAi—lentivirus)共同转导喉鳞癌 Hep-2细胞,并运用逆转录聚合酶链反应方法(RT-PCR)检测 Hep-2细胞MMP-2和 MMP-9基因的表达。通过 Boyden 小室实验观察 MMP-2-RNAi-lentivirus和 MMP-9-RNAi-lentivirus 重组慢病毒转导对喉癌细胞侵袭能力的影响。构建喉癌移植瘤模型,将 MMP-2-RNAi-lentivirus 和 MMP-9-RNAi-lentivirus 重组慢病毒瘤内注射,观察抑瘤效果。运用免疫组化方法检测移植瘤中增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,评估其对细胞增殖的影响。结果重组慢病毒 MMP-2-RNAi-lemivirus 和 MMP-9-RNAi-lentivirus 能高效地转导入靶细胞。RT-PCR 检测显示,转导后的 Hep-2细胞中 MMP-2和 MMP-9表达阴性。侵袭实验显示,实验组 Hep-2细胞中穿过人工基底膜的细胞数为(14±4)个,明显少于空载体对照组的(32±6)个(P<0.01)。体内实验显示,MMP-2-RNAi-lentivirus 和 MMP-9-RNAi-lentivirus 重组慢病毒瘤内注射后,裸鼠移植瘤平均重量和平均体积明显小于对照组,抑瘤率为46.59%,PCNA 指数也明显降低。结论慢病毒介导的 MMP-2和 MMP-9基因共同沉默能有效的抑制喉癌的侵袭,生长及增殖。

• 单位
  哈尔滨医科大学; 哈尔滨医科大学附属第二医院