重组GSTP1真核表达质粒的构建及稳定转染NCI-H520细胞系的建立

作者：曾谷清; 许艳; 易红; 李萃; 李茂玉; 张鹏飞; 李国庆; 肖志强

来源：中国现代医学杂志, 2012, (08): 14-18.

DOI：10.3969/j.issn.1005-8982.2012.08.004

• pcDNA3.1(+)/GSTP1
• NCI-H520细胞
• 稳定转染 pcDNA3.1(+)/GSTP1
• NCI-H520 cell
• stable transfection

目的构建pcD N A3.1(+)/G STP1真核表达载体并将其稳定转染到肺鳞癌细胞N C I-H 520中,建立稳定转染的N C I-H 520细胞系,为后续研究奠定基础。方法以pD N R-LIB-G STP1为模板,用PC R扩增G STP1 cD N A的编码区,并将扩增的cD N A片段与载体连接后亚克隆到真核表达载体pcD N A3.1(+)中。重组子经酶切分析及测序鉴定后,用脂质体转染技术将其导入到人肺鳞癌细胞系N C I-H 520,经G 418筛选并建立稳定的转染细胞株,应用W estern blotting检测转染前后该细胞株G STP1基因在蛋白水平的表达。结果 pcD...

• 单位
  南华大学; 中南大学湘雅医院