摘要
从西洋参cDNA中克隆得到8个bHLH类转录因子,研究了这8个bHLH类转录因子响应茉莉酸甲酯信号的表达情况。该研究以培养3周的西洋参幼苗为材料,克隆得到了8个bHLH类转录因子。采用高效液相色谱和分光光度法测定了MeJA处理不同时间西洋参不定根中人参皂苷Rg1、Re、Rb1和总皂苷的含量。利用实时荧光定量PCR检测MeJA处理后8个转录因子的基因表达量。结果表明从西洋参cDNA中克隆得到的8条bHLH类转录因子序列(Pq-bHLH21~Pq-bHLH28)核酸序列长度为762~2 013 bp。8个转录因子的氨基酸序列一致性为24.90%,每个氨基酸序列都显示出了基本的bHLH保守结构域特征,属于bHLH超基因家族成员。Pq-bHLH22和Pq-bHLH24~Pq-bHLH27共5条氨基酸序列中含有bHLH-MYC N结构域,属于bHLH基因家族中的MYC类转录因子。MeJA处理48 h内,8个转录因子都存在应答响应。在MeJA处理72 h时,Pq-bHLH24的基因表达量达到了处理组最高的106.53倍。在相关性分析方面,Pq-bHLH25、Pq-bHLH27、Pq-bHLH28表现出较强的协同趋势,Pq-bHLH21可能参与调控人参皂苷Rb1生物合成途径,而3个转录因子Pq-bHLH22、Pq-bHLH25、Pq-bHLH28与人参皂苷Re生物合成途径呈显著正相关。上述工作为进一步研究bHLH类转录因子对于人参皂苷生物合成调控的功能验证奠定基础。
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单位生命科学学院; 郑州师范学院