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摘要
为了探究裂殖壶菌(Aurantiochytrium limacinum)合成DHA的关键酶基因pks1和pks3的启动子活性，本实验首先通过染色体步移技术得到pks1和pks3基因的5′端上游序列，然后经生物信息学软件分析初步确定两段序列具有启动子特征，含有上游调控元件，可能具有启动子活性；进而以绿色荧光蛋白作为报告基因，构建了原核表达载体pAcGFP1-1-pks1 promoter和pAcGFP1-1-pks3 promoter,以及真核表达载体pYD1-pks1 promoter-GFP和pYD1-pks3 promoter-GFP,并分别转化大肠杆菌E.coli BL21和酿酒酵母S.cerevisiae EBY100,通过荧光光谱及SDS-PAGE分析等来检测重组菌株绿色荧光蛋白表达情况。结果表明这两段序列，能够使绿色荧光蛋白在原核表达系统及真核表达系统中实现异源表达，具有启动活性，可以用作基因工程中的启动子元件。
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