温阳解毒化瘀颗粒对肝衰竭IETM大鼠TLR4 mRNA,TNF-α及肝细胞凋亡的影响

作者：杜珊; 王杰; 陈斌^*; 周为; 李武; 苏煦初; 彭杰; 周月

来源：中国实验方剂学杂志, 2020, 26(02): 26-32.

DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20200222

• 肝衰竭
• 温阳解毒化瘀颗粒
• 肠源性内毒素血症
• Toll样受体4
• 肿瘤坏死因子-α

目的:研究Toll样受体4(TLR4) mRNA及其下游炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)与肝衰竭肠源性内毒素血症(IETM)大鼠肝细胞凋亡的关系,并探索温阳解毒化瘀颗粒对内毒素介导的肝细胞凋亡的调控机制。方法:SPF级雄性SD大鼠85只,随机分为正常组,模型组,TLR4单克隆抗体组和温阳解毒化瘀颗粒组(8. 925 g·kg-1)。采用D-半乳糖胺(D-Gal)腹腔注射建立肝衰竭IETM模型,TLR4单克隆抗体组和温阳解毒化瘀颗粒组在造模前5 d给予温阳解毒化瘀颗粒溶液灌胃,正常组、模型组以等容积蒸馏水代替,直至处死。各组分别在24,48,72 h随机处死大鼠并采集标本。检测24,48,72 h各组时间点血清丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平,苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织病理变化,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肝组织TLR4 mRNA表达,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测肝组织TNF-α表达,流式细胞仪检测肝细胞凋亡率。结果:与正常组比较,模型组ALT,AST升高,肝组织病理损伤程度明显加重,TLR4mRNA,TNF-α表达均增高(P <0. 05,P <0. 01),肝细胞凋亡率明显上升(P <0. 05,P <0. 01);与模型组比较,温阳解毒化瘀颗粒组ALT,AST显著降低(P <0. 01),肝组织病理损伤程度明显减轻(P <0. 05),TLR4 mRNA,TNF-α表达显著下降(P <0. 01),肝细胞凋亡率亦显著降低(P <0. 01)。结论:TLR4 mRNA,TNF-α在肝衰竭时与肝细胞凋亡呈正相关,温阳解毒化瘀颗粒能够改善肝衰竭IETM大鼠肝功能,减轻肝细胞损伤,减少肝细胞凋亡,其机制可能与其下调肝脏TLR4 mRNA表达,抑制TNF-α释放,降低肝细胞凋亡率有关。

• 单位
  湖南中医药大学; 金华市中医医院; 湖南中医药大学第一附属医院