白细胞介素-4通过上调蛋白质精氨酸甲基转移酶1的表达水平引起对氧磷酶2的精氨酸甲基化修饰

作者：杨万勇; 马丽; 任家骏; 杨旭东^*

来源：广东医学, 2022, 43(04): 434-440.

DOI：10.13820/j.cnki.gdyx.20211378

• 肺上皮细胞
• IL-4
• 蛋白质精氨酸甲基转移酶1
• 对氧磷酶2
• 甲基化修饰

目的 验证质谱筛选的结果，确定对氧磷酶2(PON2)是否为蛋白质精氨酸甲基转移酶1(PRMT1)的底物蛋白。方法 用白细胞介素-4(IL-4)刺激A549细胞后，用免疫沉淀法捕获发生精氨酸非对称性二甲基化修饰的蛋白，用梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳分析捕获的蛋白，通过银染显示差异性条带，质谱分析差异性条带中的蛋白种类。用免疫沉淀检验PON2的甲基化修饰状态。检测PON2和PRMT1对IL-4表达的浓度依赖性和时间依赖性。用免疫共沉淀检测PON2和PRMT1的相互作用，并在MS203抑制Ⅰ型PRMT后检测PON2的甲基化修饰水平的变化。诱导小鼠哮喘模型，检测PON2表达的组织细胞类型，以及肺组织中PON2和PRMT1的表达水平。结果 (1)质谱分析显示在IL-4处理的A549细胞中检出311个差异显示的蛋白，PON2为其中之一。(2)免疫沉淀显示，IL-4可促进A549细胞中PON2发生精氨酸非对称性二甲基化修饰，但IL-4刺激对PON2的表达水平无影响。(3)PON2与PRMT1有相互作用，IL-4可促进PON2与PRMT1结合，抑制Ⅰ型PRMT活性可以削弱IL-4对PON2发生精氨酸非对称性二甲基化修饰的促进作用。(4)PON2主要在小鼠气道上皮表达，且PON2的表达水平在对照组与哮喘组组织间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 PON2为PRMT1的底物蛋白。IL-4可以促进PON2发生精氨酸非对称性二甲基化修饰。

• 单位
  基础医学院; 西安交通大学; 东莞市水乡中心医院