逆转录多酶恒温扩增技术快速检测新型冠状病毒核酸方法的建立

作者：李健; 李俊; 余乐; 路静洁; 陈君; 赵林波; 谢欣莉; 陈洁^*

来源：中国消毒学杂志, 2023, 40(12): 898-902.

• 新型冠状病毒
• 多酶恒温扩增技术
• 病毒核酸

目的 建立逆转录多酶恒温扩增试纸条法（RT-MIRA-LFD），用于快速检测新型冠状病毒（SARSCoV-2）核酸。方法 依据SARS-CoV-2开放阅读框（ORF1ab）基因和核壳蛋白（N）基因序列设计RT-MIRA反应引物；筛选RT-MIRA-LF反应的最佳引物和探针；评价RT-MIRA-LF检测SARS-CoV-2的敏感度、特异度、阳性符合率和阴性预测值等诊断效能。结果 建立的RT-MIRA-LFD方法检测SARS-CoV-2核酸特异性良好，与其他类型的病毒均无交叉反应。该方法检测ORF1ab基因和N基因的最低检出限均为100拷贝/μL，该方法的敏感度为90.00%，特异度为100.00%，阳性预测值均为100.00%，阴性预测值为95.24%。结论 基于RTMIRA-LFD技术建立的检测SARS-CoV-2核酸新方法具有良好的临床诊断效能。