RNA干扰下调PLK1基因对恶性黑素瘤细胞侵袭和失巢凋亡的影响

作者：丁克云; 徐娟; 满昌峰; 范钰

来源：中华皮肤科杂志, 2014, 47(06): 413-416.

DOI：10.3760/cma.j.issn.0412-4030.2014.06.012

• 黑色素瘤
• RNA干扰
• 基因
• PLK1
• 肿瘤浸润

目的探讨RNA干扰技术下调PLK1基因对恶性黑素瘤细胞侵袭的影响和可能机制。方法用PLK1小干扰核糖核酸分子(siRNA)转染人恶性黑素瘤A375细胞后,分别用实时定量PCR和Western印迹法检测PLK1mRNA和蛋白表达,Transwe11方法检测细胞侵袭能力,以平板集落形成方法了解癌细胞集落形成情况,分别用琼脂糖凝胶电泳和TUNEL方法检测癌细胞失巢凋亡情况。结果恶性黑素瘤A375细胞经PLK1 siRNA转染后,PLK1 mRNA和蛋白表达明显下调;siRNA转染组癌细胞生长明显受到抑制。与空白对照组和脂质体对照组比较,siRNA细胞转染组侵袭性明显下降。失巢凋亡检测发现,琼脂糖凝胶电泳出现明显的梯度图谱。TUNEL结果显示,PLK1 siRNA可诱导恶性黑素瘤A375细胞凋亡,siRNA细胞转染组较空白对照组和脂质体对照组凋亡指数明显升高[3.86%±0.35%(3.125 nmol/L siRNA组),7.35%±0.36%(6.250 nmol/L siRNA组),17.56%±0.38%(12.500 nmol/L siRNA组)比1.15%±0.25%和1.18%±0.22%),均P<0.01]。结论PLK1 siRNA可抑制恶性黑素瘤细胞的侵袭,其机制可能与诱导失巢凋亡有关。

• 单位
  江苏大学附属人民医院