人参皂苷辛酸酯通过诱导肝癌细胞自噬引起的免疫原性细胞死亡机制研究

作者：宋福香; 戴珍珍; 盛晶晶; 陈佳丽; 张卉; 冯花; 潘瑶; 邓泽元; 陈芳^*

来源：中国免疫学杂志, 2023, 1-16.

• 免疫原性细胞死亡(ICD)
• 人参皂苷辛酸酯
• 癌症疫苗
• 自噬
• 三磷酸腺苷(ATP)

目的：探讨人参皂苷辛酸酯（Rh2-O）诱导肝癌细胞免疫原性细胞死亡作用及其分子机制。方法：CCK-8法检测人参皂苷辛酸酯（Rh2-O）以及自噬抑制剂3-MA对肝癌细胞活性的影响。免疫荧光法检测Rh2-O对Hepa1-6细胞CRT膜外翻的影响。Rh2-O处理小鼠肝癌细胞制备肿瘤疫苗，进行小鼠体内疫苗接种实验。实时检测细胞外ATP含量，实时荧光定量PCR检测细胞自噬相关基因的表达以及Westernblot检测细胞自噬蛋白的水平，激光共聚焦显微镜观察细胞内线粒体形态及其与自噬蛋白共定位。结果：Rh2-O浓度为150μmol/L时，对Hepa1-6细胞具有较强的细胞毒性（细胞活力：58.54%±3.56%），且在细胞膜表面可观察到大量CRT的膜外翻。疫苗接种组小鼠出瘤率为36.36%，对照组出瘤率为100%，Rh2-O制备的肿瘤疫苗有效保护小鼠免受同类型肿瘤攻击；Rh2-O可诱导细胞分泌ATP水平增加（P<0.05），自噬相关基因ATG3、 p62、 LC3 的mRNA表达水平和自噬相关蛋白LC3A、LC3B表达水平增加（P<0.05），线粒体与自噬蛋白的共定位显著增多（P<0.05）。此外，Rh2-O作用3-MA预处理的肝癌细胞后，细胞外ATP水平显著降低（P<0.001）。结论：Rh2-O可能通过诱导肝癌细胞自噬诱发免疫原性细胞死亡。

• 单位
  公共卫生学院; 南昌大学