摘要
目的:探究多聚甲醛固定外泌体对外泌体本身、细胞活性和功能的影响,为研究外泌体相关策略选择提供基础。方法:采用透射电镜和Western blot鉴定外泌体,通过外泌体转染HepG2、Panc-1、Hela细胞后的形态和功能变化,鉴定多聚甲醛固定和未固定DIOC18(3)(3,3’-二十八烷氧碳菁高氯酸盐)染色对外泌体生物学特性的影响。采用CCK-8、MTT试验、细胞凋亡试验、细胞分泌外泌体的功能和细胞本身的功能来确定多聚甲醛固定和未固定DIO染色外泌体对细胞活力和功能的影响。结果:多聚甲醛固定DIO染色外泌体转染细胞阳性率比多聚甲醛未固定组高(20.21±0.05)%(P<0.05),前者的凋亡率比后者高(12.65±0.01)%(P<0.05)。多聚甲醛未固定DIO染色外泌体转染的细胞存活率比多聚甲醛固定组高(22.84±0.16)%(P<0.05),前者外泌体分泌率比后者高(28.10±5.65)%(P<0.05)。多聚甲醛未固定DIO染色HepG2.2.15细胞上清来源的外泌体转染HepG2细胞后,HBV DNA拷贝数比多聚甲醛固定DIO染色外泌体组高3.33倍(P<0.05)。结论:多聚甲醛固定DIO染色外泌体对外泌体本身特性及示踪定位研究具有良好效果;多聚甲醛未固定DIO染色外泌体亦能达到一定的示踪目的,但更能准确评价外泌体对细胞功能调控的作用。
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单位简阳市人民医院; 川北医学院