基于核酸免疫活性分析的卡介菌生物制剂质量评价

作者：黄胜; 杨胜梅; 张兰艳; 谢敏; 周云喜; 童春义^*

来源：药物分析杂志, 2023, 43(06): 1019-1025.

DOI：10.16155/j.0254-1793.2023.06.13

• 卡介菌
• 酶联免疫吸附检测
• 胞嘧啶鸟嘌呤二核苷酸
• 抗肿瘤坏死因子-α
• 功能指数

目的:开发生物制剂卡介菌多糖核酸注射液质量评价方法。方法:基于核酸物质是卡介菌多糖核酸注射液(简称注射液)的主要活性成分之一，其免疫活性表现可反映注射液质量。以免疫核酸CpG1826为标准参比核酸，非CpG核酸No-CpG为空白参比核酸，注射液或所含核酸组份为测试核酸，采用酶联免疫(ELISA试剂盒)法测定核酸刺激巨噬细胞释放细胞因子TNF-α的浓度([TNF-α]),再采用公式IFC=([TNF-α]测-[TNF-α]空)/([TNF-α]标-[TNF-α]空)计算功能指数(IFC),根据IFC大小来评价生物制剂质量。对15批次标准样品(合格产品)进行多次平行测定，训练确定合格产品的IFC范围，再用11批次实际样品(6批次合格产品，5批次超期产品)进行方法验证。结果:从注射液提取核酸组分可显著刺激巨噬细胞释放细胞因子TNF-α,刺激现象与免疫CpG核酸一致，说明注射液中核酸物质具有类似免疫活性；15批次标准样品训练确定IFC范围为0.3～0.9;11批次实际样品中，6批次合格产品IFC在范围之内，5批次超期产品IFC偏高。结论:基于核酸免疫活性分析技术建立的功能指数IFC较好反应了卡介菌多糖核酸注射液质量，可望用于其质量评价，也为类似生物制剂质量控制提供活性评价参考。

• 单位
  湖南斯奇生物制药有限公司; 九芝堂股份有限公司; 中南大学湘雅三医院; 湖南大学