肿瘤坏死因子-α预处理人脐带间充质干细胞的条件培养基对人脐静脉内皮细胞增殖、凋亡的影响

作者：聂顺义; 周彪; 巴特; 屠华雷; 马双飞; 李武

来源：中华损伤与修复杂志(电子版), 2016, 11(06): 433-437.

• 肿瘤坏死因子α
• 间质干细胞
• 脐静脉
• 内皮细胞
• 细胞增殖
• 细胞凋亡

目的探讨100 ng/m L肿瘤坏死因子-α(TNF-α)预处理人脐带间充质干细胞(h UCMSC)的条件培养基对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖、凋亡的影响。方法本实验按随机数字表法将HUVEC分为对照组、条件培养基组和预处理条件培养基组。首先使用含有100 ng/m L TNF-α的内皮细胞培养基刺激HUVEC 12 h后,对照组更换为原培养基,条件培养基组则更换为h UCMSC的条件培养基,以及预处理条件培养基组更换为TNF-α预处理h UCMSC的条件培养基。采用MTT法测定HUVEC的增殖活性,流式细胞仪检测细胞的增殖周期,AO-EB染色和流式细胞仪定性、定量检测细胞的凋亡情况。数据比较采用重复测量方差分析。结果 MTT的检测结果提示,在培养24、48、72 h时,对照组细胞的吸光度值是0.51、0.43、0.32,而条件培养基组和预处理条件培养基组吸光度值是0.56、0.51、0.45和0.59、0.56、0.52。流式细胞仪检测细胞增殖周期(G2/M+S期)的结果示:在培养24、48和72 h时,对照组细胞处于G2/M+S期的比例是(22.34±1.03)%、(10.66±1.07)%、(9.58±0.82)%,而条件培养基组和预处理条件培养基组处于G2/M+S期的比例则分别是(27.95±1.85)%、(18.59±1.48)%、(13.02±1.91)%和(31.17±1.29)%、(22.44±2.28)%、(16.28±1.11)%,3组比较差异有统计学意义(F=58.793,P<0.05)。此外,流式细胞仪定性检测结果表明:在培养24、48和72 h时,对照组细胞的凋亡率是(18.95±1.01)%、(16.66±1.51)%、(11.37±1.01)%,而条件培养基组和预处理条件培养基组细胞的凋亡率分别是(12.04±1.13)%、(10.88±1.39)%、(6.88±1.63)%和(8.16±1.44)%、(6.97±1.34)%、(2.97±1.44)%,3组比较差异有统计学意义(F=119.372,P<0.05)。AO-EB定性检测细胞凋亡的结果与流式定量检测的结果趋势类似。结论 TNF-α预处理h UCMSC的条件培养基可发挥显著促进HUVEC的增殖和抑制HUVEC凋亡的作用。

• 单位
  内蒙古医科大学第三附属医院; 内蒙古医科大学