珍稀濒危植物五小叶槭ISSR-PCR反应体系的建立和优化

作者：郝云庆; 罗晓波^*; 王晓玲

来源：四川林业科技, 2018, 39(05): 17-21.

DOI：10.16779/j.cnki.1003-5508.2018.05.004

• 五小叶槭
• ISSR-PCR反应体系优化
• 引物筛选
• 正交设计

五小叶槭为珍稀濒危植物,在研究被子植物的系统发育和古地理、古气候等方面具有重要的科学价值。本研究采用2XTaqMaster Mix,综合考虑Taq酶、Mg2+和d NTPs,对影响五小叶槭ISSR-PCR反应的3个因素(DNA模板、引物和Master Mix)进行3水平正交试验,从而优化出五小叶槭ISSR-PCR反应最佳体系。结果表明,引物用量对反应结果影响最大,其次为DNA模板,2XTaqMaster Mix对反应结果影响最小。最佳反应体系(25μL)为:DNA模板(50 ng·μL-1)1μL,引物2μL,2XTaqMaster Mix 13. 5μL。

• 单位
  四川省自然资源科学研究院; 成都信息工程大学